猪瘟病毒定量检测技术新突破，开创猪瘟病毒定量检测新时代!
发布时间：
2017-05-17
近日，中国兽医药品监察所标准物质研究室猪瘟参考实验室研究团队建立了一种新型的RNA可视化原位杂交(ViewRNAISH)技术，并成功应用于猪瘟病毒RNA在PK15细胞上的定位与分布动态的研究。相关研究论文《AnovelViewRNAinsituhybridizationmethodforthedetectionofthedynamicdistributionofClassicalSwineFeverVirusRNA》发表在SCI期刊Virologyjournal上。
猪瘟是危害猪群的一种烈性传染病，其传播快、死亡率高，给许多的养猪业造成了重大经济损失。动物卫生组织(OIE)将其列入须申报的OIE动物疫病名录，猪瘟的病原是猪瘟病毒，因此在病毒RNA水平上研究CSFV在靶细胞上感染及复制机制，对于猪瘟防控具有重要的指导意义。
该项研究表明，采用ViewRNAISH方法，在荧光共聚焦显微镜下即可对CSFVRNA在细胞内进行清晰的定位，且灵敏度检测极限可达10-8/200?L，比猪瘟荧光抗体检测法(FAT)和免疫组化法(IHC)分别高出3至4个数量级，且该方法设计的探针能特异性与1.1、2.1、2.2、2.3亚型的猪瘟病毒结合，与BVDV、PPV、PRV和PCV-2病毒无交叉反应。本研究在细胞水平上对CSFVRNA在培养细胞中的增殖动态和复制过程进行定位和分布动态研究，可观察到CSFVRNA有在细胞核内的生活史，且具有灵敏度高、特异性强、结果便于观察等优点。有助于加深CSFV在体外细胞自身复制规律的了解，也为疫苗生产工艺中病毒的培养提供数据支持。
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